Diversidad molecular de variantes patogénicas de Vibrio parahaemolyticus en el Perú / Molecular diversity in pathogenic variants of vibrio parahaemolyticus in Peru

RESUMEN Con el objetivo de determinar la diversidad de variantes patogénicas de Vibrio parahaemolyticus en el Perú durante el periodo 1995-2017, se analizaron 102 genomas peruanos (97 clínicos y 5 ambientales) empleando el esquema de tipificación multilocus y BLASTn para la búsqueda de genes de virulencia. Se identificaron 15 tipos de secuencia diferentes, encontrándose que el genotipo ST3, perteneciente al clon pandémico, fue el más abundante, con 52% (n=53); seguido por el ST120, con 23,5% (n=24); y el complejo clonal CC345, con 11,8% (n=12). Un total de 89 cepas analizadas presentaron genes que codifican la isla de patogenicidad VpaI-7 (87,3%), mientras que 96 presentaron el gen tdh (94,1%), y 6, el trh (5,9%). Durante el periodo evaluado, se resalta la predominancia del ST3, causante de un importante brote en el pasado del Perú, además de otros genotipos patógenos que representan un riesgo latente en salud pública asociado al consumo de alimentos marinos.

ABSTRACT During the period from 1995 to 2017, in order to determine the diversity of Vibrio parahaemolyticus pathogenic variants in Peru, 102 Peruvian genomes (97 from a hospital setting and 5 from an out-of-hospital setting) were analyzed using the multilocus typification scheme and BLASTn in the search for virulence genes. Fifteen different sequence types were identified. It was found that the ST3 genotype, which is found in the pandemic clone, was the most abundant, with 52% (n=53); followed by ST120, with 23.5% (n=24); and the CC345 clonal complex, with 11.8% (n=12). A total of 89 analyzed strains presented genes encoding the pathogenicity island VpaI-7 (87.3%), while 96 presented the tdh gene (94.1%), and 6 the trh gene (5.9%). The ST3 genotype was the predominant one during the evaluated period, this genotype was the cause of a major outbreak in Peru's past history. Other pathogenic genotypes found represent a latent public health risk associated with seafood consumption.

Fatores de patogenicidade de Vibrio spp. de importância em doenças transmitidas por alimentos / Vibrio spp. pathogenicity factors of importance in foodborne diseases

As bactérias do gênero Vibrio habitam ambiente tipicamente marinho e estuarino, sendo comumente isoladas de pescados. As principais espécies de Vibrio reportadas como agentes de infecções em humanos são V. vulnificus , V. parahaemolyticus , V. cholerae e V. mimicus . V. vulnificus é considerado o mais perigoso, podendo causar septicemia e levar à morte. V. parahaemolyticus é um patógeno importante nas regiões costeiras de clima temperado e tropical em todo o mundo e tem sido responsável por casos de gastroenterites associadas ao consumo de peixes, moluscos e crustáceos marinhos. V. cholerae causa surtos, epidemias e pandemias relacionados com ambientes estuarinos. V. mimicus pode causar episódios esporádicos de gastroenterite aguda e infecções de ouvido. A patogenicidade das bactérias está ligada à habilidade do micro-organismo em iniciar uma doença (incluindo entrada, colonização e multiplicação no corpo humano). Para que isso ocorra, os micro-organismos fazem uso de diversos fatores. O objetivo desta revisão foi sintetizar o conhecimento disponível na literatura sobre os fatores de patogenicidade de V. vulnificus , V. parahaemolyticus , V. cholerae e V. mimicus.(AU)

Bacteria of the genus Vibrio typically habitat marine and estuarine environment and are commonly isolated from fish. The main Vibrio species reported as agents of infections in humans are V. vulnificus , V. parahaemolyticus , V. cholerae and V. mimicus . V. vulnificus is considered the most dangerous, may cause sepsis and lead to death. V. parahaemolyticus is an important pathogen in coastal regions of temperate and tropical climates around the world and has been responsible for cases of gastroenteritis associated with consumption of fish, shellfish and marine crustaceans. V. cholerae causes outbreaks, epidemics and pandemics related to estuarine environments. V. mimicus can cause sporadic episodes of acute gastroenteritis and infections. The pathogenicity of the bacteria is linked to the ability of the micro-organism to initiate a disease (including entry, colonization and multiplication in the human body). For this to occur, the micro-organisms make use of several factors. The objective of this review is to summarize the knowledge available in the literature on the factors of pathogenicity of V. vulnificus , V. parahaemolyticus , V. cholerae and V. mimicus.(AU)

The expression of heterologous MAM-7 in Lactobacillus rhamnosus reduces its intrinsic capacity to inhibit colonization of pathogen Vibrio parahaemolyticus in vitro

BACKGROUND: Vibrio parahaemolyticus (V. parahaemolyticus) is a Gram-negative, halophilic bacterium recognized as one of the most important foodborne pathogen. When ingested, V. parahaemolyticus causes a self-limiting illness (Vibriosis), characterized mainly by watery diarrhoea. Treatment is usually oral rehydration and/or antibiotics in complicated cases. Since 1996, the pathogenic and pandemic V. parahaemolyticus O3:K6 serotype has spread worldwide, increasing the reported number of vibriosis cases. Thus, the design of new strategies for pathogen control and illness prevention is necessary. Lactobacillus sp. grouped Gram positive innocuous bacteria, part of normal intestinal microbiota and usually used as oral vaccines for several diarrheic diseases. Recombinants strains of Lactobacillus (RL) expressing pathogen antigens can be used as part of an anti-adhesion strategy where RL block the pathogen union sites in host cells. Thus, we aimed to express MAM-7 V. parahaemolyticus adhesion protein in Lactobacillus sp. to generate an RL that prevents pathogen colonization RESULTS: We cloned the MAM-7 gene from V. parahaemolyticus RIMD 2210633 in Lactobacillus expression vectors. Recombinant strains (Lactobacillus rhamnosus pSEC-MAM7 and L. rhamnosus pCWA-MAM7) adhered to CaCo-2 cells and competed with the pathogen. However, the L. rhamnosus wild type strain showed the best capacity to inhibit pathogen colonization in vitro. In addition, LDH-assay showed that recombinant strains were cytotoxic compared with the wild type isogenic strain CONCLUSIONS: MAM-7 expression in lactobacilli reduces the intrinsic inhibitory capacity of L. rhamnosus against V. parahaemolyticus.

Crecimiento y sobrevivencia de Vibrio parahaemolyticus en ostión americano (Crassostrea virginica) almacenado en refrigeración / Growth and survival of total and pathogenic Vibrio parahaemolyticus in American oyster (Crassostrea virginica) under cold storage

Objetivo. Cuantificar las densidades de Vibrio parahaemolyticus en ostión americano (Crassostrea virginica) almacenado en refrigeración. Material y métodos. Se almacenaron 320 ostiones a 7 °C durante nueve días y se determinaron las densidades totales y patogénicas mediante la técnica NMP-PCR. Resultados. Se observaron densidades de V. parahaemolyticus tlh+ en los días 0,3 y 6 de almacenamiento con 1. 134,2.764 y 0.785 log10NMP/g, respectivamente, y en los días 0 y 3 la densidad patogénica trh+ con 0.477 y 0.519 log10NMP/g, respectivamente; las densidades patogénicas tdh+ (0.519 log10NMP/g), tdh+/trh+ (0.519 log10 NMP/g) y tdh+/orf8+ (-0.444 log10NMP/g) se detectaron al tercer día de almacenamiento. Conclusión. Los resultados sugieren que el crecimiento de V. parahaemolyticus y la ocurrencia de genes patogénicos a 7 °C involucran cambios en la expresión génica como una respuesta al estrés por frío. Esto contribuye a la sobrevivencia y virulencia de V. parahaemolyticus, lo cual representa un riesgo a la salud pública.

Objective. To quantify Vibrio parahaemolyticus densities in American oyster (Crassostrea virginica) under cold storage. Materials and methods. 320 oysters were stored at 7°C for nine days and total and pathogenic densities were determined by the NMP-PCR methodology. Results. V. parahaemolyticus tlh+ densities were observed on 0,3, and 6 days of storage at 1.134, 2.764 and 0.785 log10NMP/g, respectively, and pathogenic density trh+ on 0 and 3 days at 0.477 and 0.519 log10NMP/g, respectively; the pathogenic densities tdh+ (0.519 log10NMP/g), tdh+/trh+ (0.519 log10NMP/g), and tdh+orf8+ (-0.444 log10NMP/g) were detected on day 3 of storage. Conclusion.The results suggest that V. parahaemolyticus growth and pathogenic genes occurrence at 7°C involve changes in the genetic expression as a cold shock response, favoring V. parahaemolyticus survival and virulence, representing a health risk.

Characterization of Vibrio Parahaemolyticus isolated from oysters and mussels in São Paulo, Brazil / Caracterização de Vibrio parahaemolyticus isolados de ostras e mexilhões em São Paulo, Brasil

Vibrio parahaemolyticus is a marine bacterium, responsible for gastroenteritis in humans. Most of the clinical isolates produce thermostable direct hemolysin (TDH) and TDH-related hemolysin (TRH) encoded by tdh and trh genes respectively. In this study, twenty-three V. parahaemolyticus, previously isolated from oysters and mussels were analyzed by PCR using specific primers for the 16S rRNA and virulence genes (tdh, trh and tlh) and for resistance to different classes of antibiotics and PFGE. Nineteen isolates were confirmed by PCR as V. parahaemolyticus. The tlh gene was present in 100 percent of isolates, the tdh gene was identified in two (10.5 percent) isolates, whereas the gene trh was not detected. Each isolate was resistant to at least one of the nine antimicrobials tested. Additionally, all isolates possessed the blaTEM-116 gene. The presence of this gene in V. parahaemolyticus indicates the possibility of spreading this gene in the environment. Atypical strains of V. parahaemolyticus were also detected in this study.

Vibrio parahaemolyticus é uma bactéria marinha, responsável por gastroenterite em humanos. A maioria dos isolados clínicos produzem hemolisina termoestável direta (TDH) e hemolisina TDH-relacionada (TRH) codificadas por genes tdh e trh, respectivamente. Neste estudo, vinte e três V. parahaemolyticus, previamente isolados de ostras e mexilhões foram analisados por PCR utilizando indicadores específicos para o gene 16S rRNA, genes de virulência (tdh, trh e tlh), resistência a diferentes classes de antibióticos, e PFGE. Dezenove isolados foram confirmados por PCR, como V. parahaemolyticus. O gene tlh estava presente em 100 por cento dos isolados, o gene tdh foi identificado em dois (10,5 por cento) dos isolados, enquanto que o gene trh não foi detectado. Cada isolado foi resistente a pelo menos um dos nove antibióticos testados. Além disso, todos os isolados apresentaram resultado positivo para o gene blaTEM-116. A presença deste gene em V. parahaemolyticus indica a possibilidade de propagação desse gene no ambiente. Cepas atípicas de V. parahaemolyticus foram também detectadas neste estudo.

Higiene alimentaria para la prevención de trastornos digestivos infecciosos y por toxinas / Food safety for the prevention of the infecious and toxine of the foodborne diseases

El principal factor que interviene en el origen y prevención de las enfermedades trasmitidas por los alimentos es la higiene alimentaria. Dichas enfermedades son causadas por la ingestión de alimentos o agua contaminados con microorganismos patógenos ocasionando una infección o por la ingestión de alimentos contaminados con toxinas. Los principales agentes involucrados son Escherichia Coli, Campylobacter, Salmonella, Shigella, Listeria Monocytogenes, Norovirus, virus Hepatitis A, Astrovirus, Rotavirus, y Virus Coxsackie. Toxinas producidas por hongos o por microflora marina y los contaminantes orgánicos persistentes pueden también causar serios problemas de salud. La inocuidad alimentaría ha tomado relevancia debido a una mayor exigencia por consumidores cada día más informados y por las demandas del comercio exterior. Medidas que aseguren una adecuada higiene alimentaría nos permitirá prevenir enfermedades, principalmente digestivas, causadas por variados agentes en los alimentos. Esto se logra por la implementación de las medidas propuestas por la Comisión Internacional conocida como Codex Alimentarius

Food Safety is the main factor involved in the origin and prevention of Food-borne diseases. These diseases are caused by either the intake of contaminated foods or water or by the intake of toxin-contaminated foods. Escherichia Coli, Campylobacter, Salmonella, Shigella and Listeria Monocytogenes, Norovirus, Hepatitis A virus, astrovirus, rotavirus, and coxsackie virus are the main causative agents involved in food-borne diseases. Toxins produced by fungi or marine microflora and the presence of persistent organic polluting agents can also cause serious health problems. Food safety has become an important topic due to a more demanding and informed consumer and the foreign food trade. Measures leading to ensure a better food safety will allow us to prevent various foodborne preventive diseases, mostly in the digestive system, caused by different etiological agents. This can be achieved through the implementation of the different measures proposed by the international commission called Codex Alimentarius

Isla de patogenicidad de Vibrio parahaemolyticus en cepas chilenas clínicas y ambientales / Pathogenicity island region of clinical and environmental strains of Vibrio parahaemolyticus, isolated in Chile

Background: Most clinical isolates of Vibrio parahaemolyticus produce a major virulence factor known as the thermostable direct hemolysin (TDH). TDH is encoded by the tdh gene which is located in a genomic pathogenicity island (PAI). Most environmental isolates are described as tdh negative. Aim: To assess if environmental strains lack the full pathogenicity island or if only the tdh gene is deleted. Material and methods: Thirty eight clinical and 66 environmental strains of Vibrio parahaemolyticus were studied. PAI was characterized by polymerase chain reaction (PCR). The presence of tdhA and tdhS genes, was determined by Southern blot. Results: Fifty three environmental strains (80%) lacked a full PAI when compared with clinical strains. In environmental strains, Southern blot and sequence analysis showed that a genetic región of 80 kilobase pairs including genes from VPA1310 to VPA1396 was missing. Conclusions: These results highlight the genetic dynamism of Vibrio parahaemolyticus pathogenecity island región and suggest that new pathogenic strains could appear by horizontal transfer of the island between toxigenic and non-toxigenic strains.

Ocorrência de Vibrio parahaemolyticus e Salmonella spp. em “sashimis” comercializados em restaurantes no município do Rio de Janeiro / Occurrence of Vibrio parahaemolyticus and Salmonella spp. in sashimi commercialized in restaurants at the city Rio de Janeiro

Visando conhecer a segurança do produto "sashimi" de salmão fornecido em restaurantes, e dos riscos potenciais ao consumidor, a pesquisa objetivou avaliar a ocorrência de Vibrio parahaemolyticus e de Salmonella spp na matéria-prima, no produto final antes de sua exposição à venda e após sua exposição ao cliente; e de Salmonella spp nas mãos dos manipuladores, em dois restaurantes (RI e RII). Os estabelecimentos foram classificados pelas diferentes condições de higiene e climatização do ambiente de manipulação, sendo RII considerado o melhor. Foi verificada a ausência de Vibrio parahaemolyticus em 100% das amostras; presença de Salmonella spp. em 12,5% do total de amostras analisadas, sendo todas estas pertencentes a RII: 25% estava presente na mão do manipulador e 75%, presente na matéria-prima e produtos finais. Através dos resultados da pesquisa pôde-se concluir que ambos os estabelecimentos estavam em conformidade com a RDC 12 de 2001 da ANVISA para Vibrio parahaemolyticus, mas RII enquadrou-se fora dos padrões estabelecidos quanto à presença de Salmonella spp. O resultado sugere que RII necessita da adoção eficaz de práticas higiênicosanitárias na elaboração de "sashimi" para eliminar a presença de Salmonella spp., que é um risco potencial à saúde do consumidor.

In order to know the quality and safety of the sashimi salmon comes in restaurants and its potential risks to the consumer, this research aimed evaluated the occurrence of Vibrio parahaemolyticus and Salmonella in raw material, on the final product before its exposure to sales and after exposure to the client and Salmonella spp in the hands of handlers, in two restaurants (RI and RII). The difference between the places was classified by the conditions of environmental air handling and hygiene, and RII was considered the best. It was verified the absence of Vibrio parahaemolyticus in 100% of samples, the presence of Salmonella spp. in 12.5% of total samples analyzed, with absence in all samples of RI and presence in 25% of samples at RII. In this proven contamination, 25% was present in the hands of the handlers and 75% present in the raw material and finished products. Based on the results of research it was concluded that both establishments were in compliance with the legislation for the first microorganism, but RII, although had the best conditions of climate and hygiene, framed outside of the microbiological standards established by the presence of Salmonella spp. The results suggest that the establishment in violation of the law requires the efficient and effective adoption of adequate sanitary practices in preparation of sashimi to avoid the presence of Salmonella spp., which can pose a risk to consumer health.

Caracterização por meio de métodos moleculares de cepas ambientais de Vibrio parahaemolyticus isoladas no Brasil / Characterization by molecular methods of Vibrio Parahaemolyticus environmental strains isolated in Brazil

Vibrio parahaemolyticus é uma espécie de ambiente marinho, responsável por gastrenterite humana e associada a diversos surtos, epidemias e pandemias. As gastrenterites estão relacionadas às cepas produtoras de hemolisina termoestável direta (TDH) e hemolisina análoga à termoestável (TRH), consideradas os principais fatores de virulência da espécie. Objetivos: Estudar a viabilidade dos métodos moleculares para confirmar a identificação da cepas de V. parahaemolyticus; conhecer a distribuição dos genes relacionados à virulência (tdh, trh), e do gene tl; e conhecer a diversidade genotípica entre os isolados. Material: 52 cepas ambientais de Vibrio parahaemolyticus do Brasil foram analisadas. Para confirmar a identificação das espécies e pesquisar a presença dos genes tdh, trh e tl, os isolados foram submetidos a análises moleculares pela PCR, com primers específicos. A diversidade genotípica foi analisada pela técnica de PFGE, e a extração plasmidial seguida de eletroforese também foi realizada. Resultados: A identificação de todas as 52 cepas foi confirmada pela PCR como sendo V. parahaemolyticus. O gene tl esteve presente nos 52 (100 por cento) isolados, o gene tdh foi identificado em 2 (3,8 por cento) deles, enquanto que o gene trh, não foi detectado em nenhuma das cepas estudadas. Conclusões: A freqüente presença do gene tl pode indicá-lo como um marcador para a detecção do agente. A baixa detecção do gene tdh em cepas ambientais é comum de acordo com a literatura. Este estudo revela a efetividade da PCR na confirmação taxonômica da espécie e na detcção de genes de virulência. A análise dos perfis moleculares possibilitou a observação da diversidade genotípica entre os isolados, nos quais também foi possível a presença de plasmídios. As técnicas moleculares mostraram ser um importante instrumento no campo da saúde pública, podendo auxiliar no monitoramento do patógeno no meio ambiente, contribuindo com as autoridades sanitárias.

Avaliação quantitativa do risco de doença, causada por Vibrio arahaemolyticus, associado ao consumo de ostras (Crassostrea brasiliana) cruas cultivadas e comercializadas no Estado de São Paulo / Quantitative risk assessment of illness, caused by Vibrio parahaemolyticus, associated with the consumption of raw oysters (Crassostrea brasiliana) farmed and commercialized in the State of São Paulo

Vibrio parahaemolyticus (Vp) é uma bactéria naturalmente presente em regiões estuarinas, sendo a principal causa de gastrenterite de origem bacteriana associada a pescados, principalmente ostras cruas. Nesta pesquisa, foi desenvolvida uma avaliação quantitativa de risco para avaliar a probabilidade de Vp causar doença após o consumo de ostra crua, produzida e comercializada no Estado de São Paulo. O estudo incluiu a identificação e caracterização do perigo, a avaliação da exposição e a caracterização do risco. Um modelo matemático foi desenvolvido. Este modelo leva em consideração o comportamento de Vp em ostras na cadeia produtiva, em cada estação do ano, além da relação entre a dose de Vp ingerida e a probabilidade de desenvolver a doença. A avaliação da exposição foi desenvolvida em três etapas: cultivo, pós-coleta e consumo. Na etapa de cultivo foram considerados os fatores que influenciam a prevalência e o número de Vp em ostras no momento da coleta. Na etapa pós-coleta, foram descritas as práticas da indústria e foram considerados os fatores associados ao processamento, transporte e manipulação. Já na etapa de consumo foram considerados os fatores como a quantidade de ostras consumidas por porção, o peso médio por ostra consumida e a população de Vp patogênico no momento do consumo. O resultado do modelo quantitativo da avaliação da exposição foi, então, integrado ao modelo dose-resposta, Beta-Poisson, para se obter uma estimativa do risco. Esta estimativa expressa o impacto da exposição humana a Vp, sobre a saúde pública, associada ao consumo de ostras. A simulação de Monte Carlo foi utilizada para avaliar o efeito da variabilidade e incerteza das variáveis do modelo sobre a estimativa do risco. O modelo prediz uma probabilidade de ocorrência de doença de 4,6x10-4, por porção de ostra, consumida ao longo do ano. As variáveis que possuem maior influência sobre o risco de ocorrência de doença são a população de Vp em ostras no cultivo, a temperatura de transporte das ostras até o varejo e a porcentagem de Vp patogênico em ostra, no momento do seu consumo. O modelo evidencia que uma das maneiras de reduzir o risco de ocorrência de doença seria intervir nas condições de transporte de ostras até o varejo por meio da sua refrigeração. Com o modelo é possível identificar fatores e simular cenários para avaliar o comportamento de V. parahaemolytícus como um perigo microbiológico, ao longo da cadeia produtiva de ostra até o momento do seu consumo. Também é possível avaliar o impacto de medidas de intervenção na cadeia produtiva. As suposições adotadas limitam a aplicabilidade do modelo. Portanto, é necessário que o modelo seja validado, particularmente com relação ao número de casos de doença causados por Vp, cujos dados de vigilância epidemiológica inexistem no Brasil

Vibrio parahaemolyticus (Vp) is naturally present in estuarine regions and is the main cause of gastroenteritis associated with the consumption of bivalve molluscan shellfish, specially raw oysters. In this research, a quantitative risk assessment was developed to evaluate the probability of Vp causing disease after consumption of raw oyster, produced and commercialized in the state of Sao Paulo. The study included the identification and characterization of the hazard, exposure assessment and risk characterization. A mathematical model was developed. This model takes into account the behavior of Vp in oysters in the productive chain, for each season of the year, besides the relationship between the number of cells of Vp ingested and the probability of developing the disease. The exposure assessment was done in three steps: farming, after harvesting and consumption. At the farming step, the factors that influence the prevalence and the population of Vp at the time of harvesting were considered. At the after harvesting step, the factors associated with transportation, handling and processing were considered. At the consumption step, factors related to the amount of oysters and the average weight per oyster consumed and the density of pathogenic Vp at the time of consumption were considered. Then, the quantitative model of exposure assessment was integrated to the dose-response model, BetaPoisson, in order to obtain a risk estimate. This calculation expresses the impact of the human exposure to Vp associated with the consumption of oysters on public health. The Monte Carlo simulation was used to evaluate the effect of variability and uncertainty of variables of the model in the risk estimation. The model predicts a probability of occurrence of the disease of 4,6x10-4 per serving of oyster consumed during one year. The variables showing the greatest influence on the risk of occurrence of disease are the density of Vp in oyster in the farming step, the temperature during transportation of oysters to the retail market and the percentage of pathogenic Vp strains in oysters,' at the moment of consumption. The model indicates that the use of refrigeration during transportation of oysters to retail could reduce the risk of disease. The model allows the identification of factors and the simulation of scenarios in order to evaluate the behavior of V. parahaemolyticus, as a microbiologícal hazard, in the productive chain of oyster to the consumption. It is also possible to evaluate the impact of intervention measures in the productive chain. The assumptions Iimit the application of the model. Therefore, it is necessary to validate the model, particularly in relation to the number of cases of dísease caused by V. parahaemolyticus of which the data on epidemiologic surveillance do not exist in Brazil

Influence of Vibrio parahaemolyticus MTCC 451 on the levels of ascorbic acid and histamine in Penaeus monodon (Fabricius).

Juvenile shrimps (Penaeus monodon) weighing about 15-20 gms were procured from the grow-out ponds and reared under laboratory conditions. They were challenged with Vibrio parahaemolyticus MTCC 451 and their LD50 value was evaluated. The ascorbic acid and the histamine activity of both the control and experimental groups were assessed. The results showed a marked decline in both the parameters at all intervals. This reveals the pathogenesis of the inoculated bacterial strain, which affects the defense mechanism by reducing the glutathione content by the decreased level of ascorbic acid and letharginess by the decreased histamine content of the experimental prawns.

Estudo de Vibrio ssp. potencialmente patogênicos através de métodos moleculares / Study of virulence factors in Vibrio ssp through molecular methods

De forma similar ao V. cholerae, outros vibrios potencialmente patogênicos podem causar doença no homem em uma variedade de formas de quadros auto-limitantes até diarréia severa a cólera, septicemia, celulite e infecções de pele. Com o advento da biologia molecular, novas técnicas vêm sendo empregadas para o estudo do gênero Vibrio com o intuito de determinar presença de fatores de virulência, traçar rotas de transmissão, ou ainda como ferramenta no estudo epidemiológico destes organismos. O presente estudo visou pesquisar a presença de genes codificadores de virulência em cepas de V. cholerae provenientes de vários países, e ainda estudar do polimorfismo genético, com o emprego de iniciadores para seqüências ERIC e BOX e eletroforese em campo pulsado (PFGE), para determinar a relação entre cepas de V. cholerae, V. mimicus, V. parahemolyticus, V. fluviais e V. alginolyticus isolados de amostras de ostras e mexilhões no Brasil, e V. metschnikovii isolados de amostras de peixe isolados de outros países bem como com o Padrão ATCC de cada espécie. Foi realizada também, a confirmação da posição taxonômica de cepas de V. metschnikovii isolados de amostras de peixes, e a comparação dos padrões de bandas com isolados de outros países e cepa padrão da espécie. A posição taxonômica de cepas de V. metschnikovii foi confirmada através da Hibridização DNA/DNA, e o estudo do polimorfismo genético através de ERIC PCR, BOX PCR e eletroforese em campo pulsado demonstrou que essas são poderosas ferramentas para estudos epidemiológicos do gênero Vibrio.

Características gerais de enteropatógenos bacterianos / Bacterial enteropathogens: general characteristics

Este trabalho realiza uma revisäo sobre os principais enteropatógenos bacterianos, enfocando principalmente aspectos de sistemática, fatores de virulência e algumas características fisiológicas

Enteropatógenos como agentes de etiologia clínica humana / Enteropathogens as etiologic agents of clinical syndromes

Säo abordados os principais agentes etiológicos da gastroenterite humana, assim como o diagnóstico microbiológico de cada agente

Evaluation of virulence factors in environmental isolates of Vibrio species

Strains of Vibrio parahaemolyticus, Vibrio fluvialis and Vibrio mimicus isolated from seafood and seawater were examined for characteristics related to infectivity, such as enzymatic activity and animal assays. All strains hydrolysed DNA, starch, gelatin and chitin. Variable results were obtained with the haemolysin, chondroitin, collagen, elastin and lecithin tests. Production of thermostable direct haemolysin by V. parahaemolyticus was detected in 7.1 per cent strains derived from seafood and 2 per cent from seawater. In the animal assays, strains of V. fluvialis showed positive results at skin PF (75 per cent ), mouse lethality (100 per cent ), but no fluid accumulation in the suckling mice model was noted. Concerning V. mimicus, results showed skin PF (100 per cent ), mouse lethality (100 per cent ) and fluid accumulation in suckling mice (66.6 per cent )

Isolamento de víbrios potencialmente patogênicos em moluscos bivalves / Potential patogenic vibrios isolated in clams

Analisa 26 amostras de ostras (Crassostrea gigas) comercilaizadas na cidade de Säo Paulo e em alguns pontos do litoral de Säo Paulo, e 36 amostras de mexilhöes (Perna perna) colhidas mensalmente em 3 pontos do litoral de Ubatuba, SP, submetendo-as à pesquisa de víbrios potenciamente patogênicos, com enriquecimento em água peptonada alcalina sem cloreto de sódio e com 1 por cento de cloreto de sódio, e GSTB, e o isolamento em ágar TCBS. Os víbrios potencilamente patogênicos encontrados em amostras de ostras foram V. alginolyticus (81 por cento), V. parahaemolyticus (77 por cento), V. cholerae näo 0:1 (31 por cento), V. fluvialis (27 por cento), V. furnissii (19 por cento), V. mimicus (12 por cento) e V. vulnificus (12 por cento) e em amostras de mexilhöes foram V. alginolyticus (97 por cento), V. parahaemolyticus (75 por cento), V. fluvialis (47 por cento), V. vulnificus (11 por cento), V. cholerae näo 0:1 (6 por cento), V. furnissii (6 por cento) e V. mimicus (6 por cento). Conclui que a ingestäo de ostras e mexilhöes constitui-se em um determinado grau de risco para a saúde do consumidor